吉非替尼通过靶向circ-0000745/miR-421轴调控胃癌细胞N87增殖、凋亡的分子机制

摘要：目的:探讨吉非替尼是否通过环状RNA（circRNA）circ-0000745/微小RNA-421（miR-421）轴调控胃癌细胞N87增殖、凋亡。方法:运用细胞计数试剂盒8（CCK-8）、平板克隆实验、蛋白印迹（Western blot）分析、流式细胞术与定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）测定空白对照（NC）组、0.125,0.25,0.5μmoL·L-1吉非替尼组、si-NC组、si-circ-0000745组、NC+si-NC组、吉非替尼+si-NC组、吉非替尼+si-circ-0000745组、si-NC+anti-miR-NC组、si-circ-0000745+anti-miR-NC组、si-circ-0000745+anti-miR-421组胃癌细胞N87的活力、克隆形成、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、P21、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达、凋亡率与circ-0000745、miR-421表达。双荧光素酶实验分析circ-0000745与miR-421间的关系。结果:与NC组相比,0.125,0.25,0.5μmol·L-1吉非替尼组细胞活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量、miR-421表达量逐渐降低,而P21蛋白表达量、凋亡率、Bax蛋白表达量、circ-0000745表达量逐渐增加,且不同剂量组差异有统计学意义（P<0.05）。circ-0000745靶向负调控miR-421。与si-NC组相比,si-circ-0000745组胃癌细胞N87活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量升高,P21蛋白表达量、凋亡率和Bax蛋白表达量降低,差异有统计学意义（P<0.05）。与吉非替尼+si-NC组相比,吉非替尼+si-circ-0000745组N87细胞中活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量增加,P21、Bax蛋白表达量、凋亡率减少,差异均有统计学意义（P<0.05）。与si-circ-0000745+anti-miR-NC组相比,si-circ-0000745+anti-miR-421组N87细胞活力、克隆形成数、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量降低,P21、Bax蛋白表达量、凋亡率升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:吉非替尼通过上调circ-0000745靶向miR-421,抑制胃癌细胞N87增殖,并诱导其凋亡。